sds-page凝胶电泳原理

sds-page凝胶电泳原理：聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷，在电场的作用下，带电粒子能在聚丙烯凝胶中迁移，其迁移速度与带电粒子的大小、构型和所带的电荷有关，十二烷基磺酸钠（SDS）能与蛋白质的结合，改变蛋白质原有的构象，使其变成近似于雪茄烟形的长椭圆棒，其短轴长度一样，而长轴与分子量大小成正比。

sds-page凝胶电泳的应用：蛋白质纯度分析；蛋白质分析量的测定，根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量；蛋白质浓度的测定；蛋白质水解的分析；免疫沉淀蛋白的鉴定；免疫印迹的第一步；蛋白质修饰的鉴定；分离和浓缩用于产生抗体的抗原；分离放射性标记的蛋白质；显示小分子多肽。

SDS-PAGE有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度，其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小，比率接近于1：20时，孔径达到最小值，分子量低于10kD的小分子肽类，即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离，或是显不出色，或是显带较弱，带型弥散。且分子量越小，效果也越差。