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trizol法提取rna原理

生活经验佚名2023-04-16

trizol法提取rna原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分,加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相,RNA存在于水相中,水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收,移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性,目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA,RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了A-U、G-C配对外,G-U也可以配对。

在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA),mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。

trizol法提取rna法优点:提取成本低,适用物种广泛,操作者可根据不同实验材料的特点灵活调整实验步骤达到最优的提取效果,适用于经验丰富的科研老司机;缺点:操作步骤繁琐、耗时长。